药分 分光光度法
第六章分光光度法中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职)O+^"W*l1P V/F
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第一节紫外可见分光光度法医学生论坛4s#J-q'g$y#_2o$w
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一、基本原理医学生论坛7M#m*y,w,h&m0f&w p%Q9C
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紫外--可见分光光度法:是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。bbs.yxsjy.net3S*H9Q)M!`
*N-~)U#]6N)_:K医学生论坛 波长长(频率小)的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大。医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学"G#W6F.v)T,~,~
)N6T3|3j3[3k$_*P中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职 100nm200nm400nm800nm400um1mbbs.yxsjy.net&x%o,S$X-@:T/@9c0c
#U#A/v/k4r中国医生、医学生共同探讨,互相促进的医学卫生社区。 通指
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X-射线紫外区可见区红外区微波区无线电波区;`({5O-Z;m.}/@
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Beer-lambert定律:A=ElcA--吸收度E-吸收系数l---液层厚度c---溶液浓度
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7S#i'Z1f9p9Y%T)J,v医学生论坛 吸收度浓度与厚度的关系。是吸收光度法的基本定律,重要前提是单色光。中国医生、医学生共同探讨,互相促进的医学卫生社区。8e7V;A!a,K.k
中国医生、医学生共同探讨,互相促进的医学卫生社区。'J!g(k&\2o;q/t+I
摩尔吸收系数:指在一定波长下,溶液浓度为1mol/L,厚度为1cm时的吸收度,用表示。bbs.yxsjy.net5W+Q*E;L8f;X8A
!\,h6? O0p$z)|/g3|4P 百分吸收系数:指在一定波长下,溶液浓度为1%(W/V),厚度为1cm时的吸收度,用表示。
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影响Beer定律因素:化学因素,光学因素
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%n+Q1M.Y4N4c,j%fbbs.yxsjy.net 二、紫外--可见分光光度计:主要部件:
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1、光源:要求光谱的光源,2、氢灯和钨灯(350nm)医学生论坛1S,Z,H'\&X'k2C"a
1w)u%b/L8p4} U5T8c.R医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学 3、单色器:进口狭缝、准直镜、色散元件(棱镜和光栅)、聚焦透镜和出口狭缝组成。
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4、吸收池:用光学玻璃制成的吸收池,5、只能用于可见光区。用熔融石英(氧化硅),6、可见紫外光区。
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7、检测器:光电池:(硒光电池:用于可见光;硅光电池:紫外可见光)内阻小,8、易疲劳。
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光电管:内阻高,电流易放大。中国医生、医学生共同探讨,互相促进的医学卫生社区。7T,Q;n1?/~'u,f/z7C5I#G @
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9、讯号处理和显示器4_-C8j3{"J:O/~.l#q
"I!Y-d$~"U医学生论坛 三、定性与定量方法:
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+X/m5U(}%Z/S.i9w-M医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学 (一)、定性鉴别:是多数有机化合物具有吸收光谱特征。一般用对比法。
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1、对比吸收光谱特征数据2、对比吸收度(或吸收系数)比值3、对比吸收光谱的一致性中国医生、医学生共同探讨,互相促进的医学卫生社区。7I1[.Q#G!E%{%H'z$[!~
医学生论坛%_;w.e1W6F5q
(二)、纯度检查:杂质检查与杂质限量检测中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职#j9m8o'e2Y1e
中国医生、医学生共同探讨,互相促进的医学卫生社区。.?%P(`0|/D.n
(三)、含量测定:中国医生、医学生共同探讨,互相促进的医学卫生社区。;H:X0^4e-]4{!]9Y
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1、吸收系数法2、标准曲线法3、对照法
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W%o+@;M8g8Bbbs.yxsjy.net 第二节荧光分析法
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(l+t!X7~!_'f$Gbbs.yxsjy.net 荧光分析法:利用荧光的物理特性而进行定性与定量测定的方法。荧光法比紫外可见灵敏。医学生论坛-?6G8P#Y5_!P6E%`#l;D0Z0d
._(B1_5X/r-Q&D医学生论坛 荧光光度计:激发光源、样品池、检测器、滤光片和单色器。中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职"R"x E+D5J;K.s*e
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第三节红外分光光度计
#x"t9@7A/I3j5T4b(h中国医生、医学生共同探讨,互相促进的医学卫生社区。中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职+z n*K.?5@"^3y(w
红外线:波长大于0.76um,小于500um的电磁波。Hooke定律来描述分子的伸缩振动。bbs.yxsjy.net+_"p A,\:Y5s$P a
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当分子的振动频率与入射的红外频率相同时,分子对红外产生吸收。伸缩振动和弯曲振动。
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8u k)a6o(~+I1Xbbs.yxsjy.net 基频峰:分子吸收一定频率的红外线,振动能级由基态(V=0)跃迁至第一激发态时产生的吸收峰。中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职)b&l9}*R0U2n ^4I/n
2j)V x$J!Q3n:x#a:o医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学 倍频峰:振动能级由基态跃至第二、三激发态。统称泛频峰。中国医生、医学生共同探讨,互相促进的医学卫生社区。!b6L"B/w*i&V9V0j$o
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吸收峰:用于鉴别官能团存在的吸收峰称特征吸收峰。
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指纹区:1250-400cm(8.0-25um)的低频区称为指纹区。
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7K$v4H&x5Lbbs.yxsjy.net 红外分光光度计主要部件:光源、吸收池、单色器(棱镜和光栅)和检测器(真空热电偶)及记录装置。