综合辅导药分 色谱法

　　第七章色谱法中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。5M3j&Z+e1O'T1W#o
bbs.yxsjy.net0P"H6j1T"d*e3C9l
　　第一节概述
2f;s;U/?2vbbs.yxsjy.net
&{9d%F'T(G%C6`%S!X.E医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学　　色谱法：是一种物理或物理化学分离方法。用于定性鉴别、纯度检查、含量测定。
'R;x1]8l8U医学生论坛
9T*k.] ]!q$~7M5I0Y9I医学生论坛　　分配系数：组分在固定相和流动相之间的分配平衡时的浓度之比。K=医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学;t2Y$J&@-j-O.W

9o(L9@0i'~4{9@医学生论坛　　容量因子：又称质量分配系数，即达到分配平衡后，组分在固定相和流动相中的质量之比。
)Q8H*F8V#O6S;v医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学医学生论坛.M7P;D5_+v2}
　　第二节薄层分析法
1D7x.V4W,t$Z!?$R.p中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。
!d+c2C!}#E7b&o"p-L0P中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职　　一般指吸附薄层色谱法，固定相为吸附剂的薄层吸附法。K值越大随展开剂移动的速度越慢。%X5b+R2K#{4f"e

+G6Y&o4M7p1^1@6U中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。　　比移徝：在薄层色谱法中，组分的迁移距离()与展开剂的迁移距离()之比称为比移值()。
'c&v5r(x&?5|'U(u中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学#f(G!P7\,s
　　R最佳范围是0.3-0.5，可用范围是0.2-0.8。
#`*h,Y.f2a&y;Y&F9H中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职:h8o'V7m!]&q+p'd,f!I
　　吸附剂：吸附薄层色谱法的固定相。常用吸附剂有：硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素和聚酰胺。
2S$l'A6P"X"T5a)P#Qbbs.yxsjy.net医学生论坛8D6C:x6{ @/A9l
　　硅胶：在105-110C加热30分，使硅胶吸附力增加，称为活化。具微酸性，适分离酸性中性物质。/y$g k3c&?/]
bbs.yxsjy.net t!W$`)?,c+a
　　氧化铝：碱性、中性、酸性。中性用得多。
0I$a6Y3F6v5t1v医学生论坛
7@2n7?7_+g;~ A6Y+D　　制备薄层板：要求吸附剂涂布均匀表面光滑，使用前检查均匀度。2000版用机械涂布法。活化。
'f+E7R%g6r0R3{%v中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职医学生论坛!G:x(k$Z-P
　　吸附剂与展开剂的选择：分离极性较强的组分时，宜选用活性低(活度级别高)的薄层板，以极性强的展开剂展开。反之
:N1e/|"a,b;Q-M y医学生论坛
/R7P-D#Q;q'Y3A　　点样：体积宜在20ul以下，样径不超过2-3mm，点间距离为1.5-2.0cm，距底2.0cm。医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学)?6L+N:E:j#E.j

!a"H"h*M4['N7R,i7K2w)L*S中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。　　显色方法：直接喷雾法、浸渍法、压板法。
#K&q O2I7U1f1D医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学7y/I3a)W5}2p%l:v*O
　　定性分析方法、纯度检查、定量分析方法(洗脱测定法和直接测定法)。bbs.yxsjy.net'{"j,y:g'C
&t0v%y"H1i.I,A9p
　　第三节气相色谱法
/|0w4V-E5m(r!y2\中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职bbs.yxsjy.net$c6?:P-?(c2W2X,W4F:U
　　气相色谱法：以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法。不适用于难挥发和热稳定性差的物质分析。
!|9f n5V8u!]医学生论坛医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学,J9~(L,u(?0Z0N"c7o7X2|
　　原理：各组分在固定相与载气(流动相)间分配系数不等，按大小依次被载气带出色谱柱，小先流出。
9d/n"E3@.b6N,N中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。8j&u'B5Y L(H K
　　一、基本原理：中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。,E'F1W*}9K

#A/e.H9?1c6n医学生论坛　　(一)、基本概念：,V"^&r'D%q'K,o4s7P

9D5Y9d1C!V+N+a医学生论坛　　一个组分的色谱峰用三项参数：峰高或峰面积(用于定量)、峰位(用保留值表示，用于定性)、峰宽(用于衡量柱效)。
$V(j7n6j)g
7I X(\8i!L3cbbs.yxsjy.net　　(1)、保留时间(tR)：从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学)i/D%p!U'r2q"h

#r1e(S$Q8_-v7l　　(2)、死时间(t0)：分配系数为零的组分的保留时间。
:M"A"v!w,?0H i'P中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职
'C3P+z%F5x+V/V;K!@0?中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职　　(3)、相对保留值(r)：两组分的调整保留值之比。
)J6`/U j%e V6u/M&M.S中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职)`&M4y2n&H
　　(4)、半峰宽(Wh/2)：峰高一半处的峰宽。医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学7f6_#v#`7l
中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职#M6]/O \.A9R$L
　　(二)、塔板理论：
#D4z#t4J+R Ubbs.yxsjy.net中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职"m%V6O2H;g:F4J(W+X0D
　　塔板理论方程式(高斯方程式)：
5r U9O8x3|%U2~5B$u医学生论坛医学生论坛8}!b-y7D"o#j2J7u
　　理论塔板式数：理论塔板高度：中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职;u&w5x-B(O+l2P
中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职2h,h$a+F(z)N5h+A(S"d2W5b5?
　　(三)、速率理论：H=A+B/u+Cu医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学%K%|4v,m/K*M4K/x3u
中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。-z1B#` U9P8E"P2P
　　影响塔板高度的因素：1、涡流扩散2、纵向扩散3、传质阻抗
"W5m%Y-O5_3e)M:}2a%l#W"d a中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职9n5O5q0f#w9J
　　二、气相色谱仪：
#c0T3Q:z-|$Z医学生论坛
-F;v6g!g9b)b$|-E中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职　　(1)、色谱柱：固定相与柱管组成。填充柱、毛细管柱；分配柱、吸附柱
0~$]/u1J.j1u1g)V中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。&`!{/T5\*j
　　(2)、固定液：高沸点的液体，操作下为液态。甲基硅油、聚乙二醇等中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。#^8K s0w$O0T8c+C4g

3M&_#k {%w/h中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。　　选择原则：按相似性、按主要差别、按麦氏差别选择。
)_9m/B,^8x;S:w(h)o,S;h%J医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学
.t'q1\0_4J2g;~(X6\(I$Y医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学　　(3)、载体：化学惰性的多孔性微粒.c&K"Y8B&f!t)y"k&V!K
医学生论坛9i&H p2C+b4f(f&J%F+G5B
　　(4)、毛细管色谱柱：开管型、填充型医学生论坛7x5q,g0^;n

&f'x&X!W,k.h　　(5)、检测器：1、浓度型检测器：热导检测器和电子捕获检测器
"K&]/N7Q G"y4O&G;o中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职
7j*r)q1_:a/z8M$m-_中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职　　2、质量型检测器：氢焰离子化检测器
1N:\"Z7V5c医学生论坛医学生论坛#V$T2u(T'n.R%O.x6\!f4G(u
　　中国药典2000对气相色谱规定：除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱柱材料不得任意更改外，其他均可适当改变，色谱图于30min内记录完毕。医学生论坛#E&?3Z5L,Q*c
医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学/g"B3l9}7A)o!e
　　第四节高效液相色谱法2D1M0m6E-L G

:O4R6L&n,W0@$b6dbbs.yxsjy.net　　1、基本原理：影响柱效的主要因素是涡流扩散和传质阻抗。中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。0f4g p:^#O8\;|1S(k0K.s$y

*m+N0P6m O$F:t.j医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学　　分类：1、液固吸附色谱法：流动相为液体，固定相是固体吸附剂。
-Q-Y)p y!L+\)Y1w中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职
*I4E5[/[!l0n6X3N)@医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学　　2、液--液分配色谱法：固定相几乎全是化学键合硅胶，又称化学键合相色谱法。4]9d+h5A)](s
医学生论坛3^9c"`'a/[3h)l5U5T1B
　　按固定相和流动相的极性2又分：正相色谱法和反相色谱法
"z L9}'d6f1O,b5z7a+Q/v!j中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职医学生论坛)j4j8K6W*l)i
　　正相色谱法：流动相极性小于固定相极性的色谱法。用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质，用于含有不同官能团物质的分离。极性弱组分先流出
5l$B*R8C.[2_医学生论坛
)J X+s _3p#r;^$xbbs.yxsjy.net　　反相色谱法：……………大于………………………用于分离非极性至中等极性的分子型化合物
#n,}!\+{ d医学生论坛中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。2o6e3~2^#u*O/r
　　2、高效液相色谱仪：医学生论坛!d&M6b#~:G3W0t6s

4]7n$m%E'y"\+c$b9ibbs.yxsjy.net　　1、高压输液泵2、色谱柱3、进样阀
9Q'^#S;u#\'@%?9e4S,G&|医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学:E-a9W2F*V F+B'r's$W
　　4、检测器：紫外吸收检测器、荧光检测器、差示折光检测器、电化学检测
:e(H%u)f1b&T中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。$c K%O$o3{ W&T
　　中国药典2000对高效液相色谱法规定：除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意更改外，其余均可适当改变，色谱图于20min内记录完毕。 r3E.J#}2B
医学生论坛1G/f1n)B5q3{9s
　　第5节色谱系统适用性试验和定量分析方法中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。5w-Z U'~/\4V6o2{,f

$f,c$o4{7b:K$c　　一、系统适用性试验
1W3a!~,M*w"a#t9L#]医学生论坛 F$j"Y%W%z#j!Q
　　1、色谱柱的理论板数：
4F!o2`,h&\(]6W5H!n*G"M1o"`2n
　　2、分离度：应大于1.5医学生论坛3U;M"w/y%k$K/]-s
bbs.yxsjy.net6E7c0D&|(i1_6Z
　　3、重复性医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学8J;o(p!H,l%t3y'e4e

6x"`4~!}9K&w"s"V　　3、拖尾声因子：0.95-1.05之间中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。&d9p)~/q+l'q.`
医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学(R+c+B!`4a&G%f8u
　　二、定量测定法：bbs.yxsjy.net+a;D+J7y"@-c&|
中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职+f:L;X3[!o)`
　　1、内标法加较正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量医学生论坛&h A.m9^4K7s"i"?;l

+T#}8l#D0Z4F%T3s　　2、外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职1P _7z3K#L.~(o6F
医学生论坛9\*l*H!k#d2A
　　3、加较正因子的主成分自身对照法bbs.yxsjy.net,p)h,r(u0@)D&X(?

;Z.a7g;?;v0O5D1v医学生论坛　　不加较正因子的主成分自身对照法
0_'_)l6{0h中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职7^2|%M$j!J
　　第六节电泳法
$H(J;D0q'`0U6c%i7m)v&g/obbs.yxsjy.net
-Z%V#d!w&f+h%V:f(K5b-_bbs.yxsjy.net　　电泳法：在电场的作用下，依据各组分之间淌度的不同实现分离的方法。分离程度取决于淌度之差。
$]9o0]5\)u(|7X6}医学生论坛
2[ `6_)K!S#m)a中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。　　一、基本原理：电泳迁移速度为：电泳淌度：电场强度
"J$W*V/u7N;|(i;}8Y中国医生、医学生共同探讨，互相促进的医学卫生社区。
-|;@/S9u%p!_&m-S医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学　　影响电泳分离的条件：1、缓冲液的PH值和离子强度2、电场强度3、样品浓度
9Z8\:U2I,G3}中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职
+t3R1U)n:p"u.d-J中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职　　二、电泳仪：医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学"s9~/^0L7F+f.`9h$E
R:e,_:f9r4X%A$~+y
　　3、各类电泳法：医学生论坛.U$~/U2?2|3{%q!l5C

6Y5A7e(`:r%a医学生论坛　　(1)、纸电泳法(2)、醋酸纤维素电泳法：主要用于测定蛋白质相对百分含量
(z%|+G L-o#W-_1[3r)V9S%p医学生论坛
!W#Q B8K*@;S6~;q5D医学生论坛　　(3)、琼脂糖凝胶电泳法：(4)、聚丙烯酰胺凝胶电泳法bbs.yxsjy.net!_9v*G0}#D:T7s

2i%s&J0b+W&S%R中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职　　(5)、SDS聚丙烯胺凝胶电泳法：测定蛋白质的分子量中国医学论坛|医学卫生讨论社区|医学招聘求职8}!d*t#M#_6t6H2r
医学生论坛 医学招聘 医学生求职 医生招聘 医学影像 医学教育 临床医学3R2w5F6k+W.\4`0R7H
　　四、毛细管电泳法简介：以弹性石英毛细管为分离通道，高压直流电场为驱动力，依据样品中各组分之间的淌度和分配行为上的差异而实现分离的分析方法。